別構(gòu)酶具有別構(gòu)效應(yīng),即一些小分子化合物與酶蛋白分子活性中心以外的某一部位特異結(jié)合,引起酶蛋白分子構(gòu)象變化,從而改變酶的活性。
細(xì)胞本身的生長(zhǎng)特性?:有些細(xì)胞本身就有抱團(tuán)生長(zhǎng)的特性。例如,上皮樣或神經(jīng)母細(xì)胞瘤樣的細(xì)胞更喜歡抱團(tuán)生長(zhǎng),而成纖維樣細(xì)胞則更喜歡分散、均勻生長(zhǎng)?。
酸式滴定管的玻璃活塞是固定配合該滴定管的,所以不能任意更換。要注意玻塞是否旋轉(zhuǎn)自如,通常是取出活塞,拭干,在活塞兩端沿圓周抹一薄層凡士林作潤(rùn)滑劑(或真空活塞油脂),然后將活塞插入,頂緊,旋轉(zhuǎn)幾下使凡士林分布均勻(幾乎透明)即可,再在活塞尾端套一橡皮圈,使之固定。注意凡士林不要涂得太多,否則易使活塞中的小孔或滴定管下端管尖堵塞。在使用前應(yīng)試漏。
效應(yīng)階段是指免疫應(yīng)答產(chǎn)生的效應(yīng)產(chǎn)物(抗體、細(xì)胞因子和效應(yīng)T細(xì)胞)發(fā)揮免疫效應(yīng),清楚非己抗原或誘導(dǎo)免疫耐受,維持機(jī)體平衡或誘發(fā)免疫相關(guān)性疾病的階段。
凝膠色譜不同于以上三種分離方法。凝膠色譜是根據(jù)分子大小用分子篩效應(yīng)來分離樣品組分的。這個(gè)方法也叫排阻色譜或粒度排阻色譜。具有一定孔徑的多孔性合成聚合物經(jīng)常用作填料。
化學(xué)反應(yīng)的速度隨溫度增高而加快,但酶是蛋白質(zhì),可隨溫度的升高而變性。在溫度較低時(shí),前一影響較大,反應(yīng)速度隨溫度升高而加快。但溫度超過一定范圍后,酶受熱變性的因素占優(yōu)勢(shì),反應(yīng)速度反而隨溫度上升而減慢。常將酶促反應(yīng)速度最大的某一溫度范圍,稱為酶的最適溫度
細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融,實(shí)驗(yàn)證明這樣可以最大限度的保存細(xì)胞活力。如今細(xì)胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑,這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性,加上緩慢冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成,從而減少由于冰晶形成造成的細(xì)胞損傷。復(fù)蘇細(xì)胞應(yīng)采用快速融化的方法,這樣可以保證細(xì)胞外結(jié)晶在很短的時(shí)間內(nèi)即融化,避免由于緩慢融化使水分滲入細(xì)胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對(duì)細(xì)胞造成損傷。
細(xì)胞培養(yǎng)所用物品清洗、消毒要徹底,各種溶液滅菌除菌要仔細(xì),并在取樣檢菌一周后確認(rèn)無菌才能使用。同時(shí),在無菌過濾操作中,隨著濾過體積的增大,濾膜破損的可能性增加,故應(yīng)選擇最后過濾的液體進(jìn)行檢測(cè)。定期對(duì)二氧化碳培養(yǎng)箱進(jìn)行消毒。具體操作:75%的酒精搽拭培養(yǎng)箱后,使用可移動(dòng)的紫外燈至少消毒30min,加入高壓滅菌過的超純水于培養(yǎng)箱水槽中保持濕度。也可配制300ml的飽和硫酸銅加3L滅菌超純水混合成硫酸銅溶液加入水槽中。
抗原抗體反應(yīng)—凝集反應(yīng)(agglutination)指顆粒性抗原(細(xì)菌、細(xì)胞等)與相應(yīng)的抗體,或可溶性抗原(亦可用抗體)吸附于與免疫無關(guān)的載體形成致敏顆粒(免疫微球)與相應(yīng)的抗體(或抗原),在有適量電解質(zhì)存在下,形成肉眼可見的凝集小塊。