糖化酶又稱淀粉α-1,4-葡萄糖苷酶,此酶作用于淀粉分子的非還原性末端,以葡萄糖為單位,依次作用于淀粉分子中的α-1,4-糖苷鍵,生成葡萄糖。此酶作用于支鏈淀粉后的產(chǎn)物有葡萄糖和帶有α-1,6-糖苷鍵的寡糖;作用于直鏈淀粉后的產(chǎn)物幾乎全部是葡萄糖。此酶產(chǎn)生菌主要是黑曲霉(左美曲霉、泡盛曲霉)、根霉(雪白根酶、德氏根霉)、擬內(nèi)孢霉、紅曲霉。
將有機(jī)溶劑蒸干,于殘?jiān)屑佣窟^量的酸滴定液使溶解,再用堿滴定液回滴剩余的酸;若生物堿易揮發(fā)或分解,應(yīng)在蒸至近干時(shí),先加入酸滴定液"固定"生物堿,再繼續(xù)加熱除去殘余的有機(jī)溶劑,放冷后完成滴定。
電泳圖中通常會使用DNA Marker,這是一種已知片段長度的DNA片段。通過比較未知樣品和Marker的遷移距離,可以估計(jì)未知樣品的DNA片段大小。
生化試劑盒通過化學(xué)反應(yīng)/酶促反應(yīng)或物質(zhì)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)測定樣本中物質(zhì)含量或酶活;所用儀器一般為分光光度計(jì)和酶標(biāo)儀,兩者的測定原理都是朗伯比耳定律:A=kbc,即當(dāng)適當(dāng)波長的一束平行單色光照射固定濃度均勻溶液時(shí),其吸光度與光通過的液層厚度成正比。土壤、水質(zhì)、動(dòng)植物組織、血清、細(xì)胞細(xì)菌、食品等樣本均可以進(jìn)行測定。
RNase酶非常穩(wěn)定,是導(dǎo)致RNA降解最主要的物質(zhì)。它在一些極端的條件可以暫時(shí)失活,但限制因素去除后又迅速復(fù)性。用常規(guī)的高溫高壓蒸氣滅菌方法和蛋白抑制劑不能使所有的RNase完全失活。為了獲得高質(zhì)量的真核細(xì)胞mRNA,必須使用RNA酶的抑制劑或采用下述的破碎細(xì)胞和滅活RNA酶同步進(jìn)行的方法,最大限度地降低細(xì)胞破碎過程中所釋放的RNA酶的活性。
蘇木素-伊紅(hematoxylin/eosin)染色法是一種用普通光學(xué)顯微鏡觀察凋亡細(xì)胞形態(tài)學(xué)特征的簡便方法。細(xì)胞凋亡時(shí)主要的形態(tài)學(xué)變化為細(xì)胞體積變小,胞質(zhì)濃縮,染色質(zhì)高度凝集、邊緣化,呈新月狀,隨后染色質(zhì)裂解成大小不等的塊狀,核膜裂解,細(xì)胞以類似胞吐的方式形成凋亡小體。蘇木素容易被氧化,其氧化產(chǎn)物蘇木紅是真正的染料,蘇木紅與鋁結(jié)合形成一種帶正電荷的藍(lán)色色精,呈堿性。帶負(fù)電荷的脫氧核糖核酸根和帶正電荷的藍(lán)色色精進(jìn)行極性吸附而完成細(xì)胞核的染色。伊紅可分為幾種,如伊紅Y和伊紅B等。伊紅Y是一種酸性紅色胞質(zhì)性染料,對細(xì)胞質(zhì)、肌纖維及膠原纖維具有著色性,呈粉紅色。細(xì)胞經(jīng)HE染色后,細(xì)胞核呈藍(lán)紫色,細(xì)胞質(zhì)呈粉紅色,根據(jù)凋亡細(xì)胞的形態(tài)學(xué)特征可觀察細(xì)胞凋亡的情況。
rRNA在蛋白質(zhì)合成中的功能尚未完全明了。但16 S的rRNA3’端有一段核苷酸序列與mRNA的前導(dǎo)序列是互補(bǔ)的,這可能有助于mRNA與核糖體的結(jié)合。
細(xì)菌在適宜的條件下,適合生長的固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部,經(jīng)過一定時(shí)間的培養(yǎng),分裂繁殖出巨大數(shù)量的菌體,形成一個(gè)肉眼可見,有一定形態(tài)的獨(dú)立群體,稱為菌落。